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芦荟的无性快速繁殖
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芦荟的无性快速繁殖
周根余 丁洪峰 施望敏 程磊
提 要 对芦荟的无性快速繁殖方法进行了试验,结果表明:纵切接种 可使芦荟再 生芽的能力提高8~9倍;不同高度幼苗纵切接种形成芽以及长根的能力都存在显 著差异 ;增殖培养基为MS+6-BA 3mg/L;生根培养基为MS+NAA 0.3mg/L。 关键词 芦荟;纵切接种;快速繁殖
Fast Asexual Propagation of Aloe vera
Zhou Genyu,Ding Hongfeng,Shi Wangmin,and Cheng Lei (Life & Environment Science College,Shanghai Teachers University,Shanghai 200234)
Abstract This paper deals with the method of fast asexual propa gation of Aloe vera,the results are as follows:The ability can be increased eight to nine times through bud-split inoculation;In addition,the ability of bud regeneration and root formation is dependant on the height of plantlet.Pro pagational media: MS+6-BA 3 mg/L;Rooting media:MS+NAA 0.3 mg/L Key words Aloe vera L.;Fast propagation;Bud-split inoculation
1 目的、材料与方法 芦荟(Aloe vera L.)通常采用分株繁殖或扦插繁殖,繁殖率低〔1〕。黄祖传等〔1〕 通过组培使其芽数在一个月内增殖 4.5倍, 陈雄庭等〔2〕使其在30~40d形成5~8个侧芽。作者为进一步提高其繁殖系数,对接种方 式、激素调控进行了试验。取芦荟幼苗经流水冲洗数小时后,于75%酒精中漂洗30s,再用 3%次氯酸钠溶液表面消毒20min,无菌水冲洗5次,接种在1/2MS培 养基(大量元素减半,其余成分不变)上,琼脂 0.8%,不加蔗糖。培养温度(26±2)℃,光 照12h/d,光强60μmol.m-2.s-1,pH调至5.8, 一周后即得无菌苗。切取幼苗上面大部分 叶片进行两种方式纵切后 接种。纵切1:沿两边对称叶片的中央纵切;纵切2:沿叶片的 中心线纵切。
图1 芦荟幼苗纵切接种方法示意图 Fig.1 Diagram of inoculation by bud-split of Aloe shoot
2 结果与分析 2.1 苗高及接种方式对芦荟再生芽能力的影响 取2、3、4cm 3种高度的无根芦荟幼苗 各20株,分别以3种方式接种于含6-BA 1mg/L的MS培养基中培养30d,统计芽诱导数,运用 q测验进行多重比较,结果 显示(表1):纵切1和纵切2接种的芽再生率明显高于常规接种,繁殖系数为后者的8~9倍 , 但两种纵切方式之间差异不显著;苗高3cm的芦荟芽发生率明显高于苗高2cm处理,其 余高度之间没有显著差异。
表1 苗高及接种方式对芦荟再生芽能力的影响 Table 1 Effect of height of shoots and inoculation methods on propagation ability
苗高 Height (cm) 接种方式 Inoculation method 接种数 Inoculated number 芽再生Bud regeneration 再生率 Rate(%) 总数 Total 平均数** Average** 2.0 常规 Normal 20 25 33 1.65 纵切1 Split 1 10(20)* 60 63 6.30 纵切2 Split 2 10(20) 50 50 5.0 0 3.0 常规 Normal 20 35 43 2.15 纵切1 Split 1 10(20) 80 92 9.2 0 纵切2 Split 2 10(20) 75 81 8.1 0 4.0 常规 Normal 20 25 38 1.90 纵切1 Split 1 10(20) 70 90 9.0 0 纵切2 Split 2 10(20) 70 85 8.5 0
*10棵苗各切为两半,形成20个外植体;**平均每棵苗诱导的不定芽数。 *Split 10 shoots form 20 explants;**Average buds-adventitious buds of every shoot. 2.2 不同浓度KT、6-BA对芦荟不定芽形成的影响 将苗高3cm具4~5片叶的芦荟采用纵切 1方式,分别接种到6-BA、KT浓度不同的MS培养基上。培养20d后统计并经方差分析显示: 不同浓度KT间芦荟不定芽形成差异极显著(P<0.01),KT 3mg/L效 果较佳,每棵可形 成约8个不定芽。6-BA 3mg/L的效果更佳,每棵可形成15个不定芽;当培养至30d时可形成20个不定芽(表2),是 国内已有报道水平〔2〕的3 ~4倍。
表2 不同浓度6-BA对芦荟不定芽形成的影响 Table 2 Effort of different concentrations of 6-BA on the induction of adventitious buds
6-BA (mg/L) 接种苗数 Number 不定芽Adventious bud number 平均数Average 总数Total 0 9 1.9 17 1 10 9.5 95 2 9 14.3 139 3 9 20.2 182 5 9 14.1 127
2.3 NAA浓度和芽高对芦荟生根的影响 无根芦荟在含NAA的MS培养基中培养10d的结果( 表3)表明:适当浓度的NAA(0.3mg/L)对长根具有明显的促进作用,而浓度过高( 5.0mg/L)抑制根的分化。在NAA 0~3.0mg/L范围内,随着浓度 增加,平均根数相应增加(R=0.839,P<0.05),而平均根长相 应缩短(R=-0.827,P< 0.05)。
表3 NAA浓度对芦荟根分化的影响 Table 3 Effort of different concentrations of NAA on rooting of Aloe
NAA (mg/L) 接种芽数 Inoculated number 平均根数 Average number of root 平均根长 Average length of root(cm) 0 20 3.6 3.14 0.1 20 4.2 2.64 0.3 20 5.3 2.56 0.5 20 8.2 1.73 1.0 20 11.9 1.65 3.0 20 12.7 1.17 5.0 20 0 0
随着芦荟苗高度的增加,其发根率、平均根数、平均根长都增加。苗高为2、3、4cm ,其发根率分别为40%、66.7%和100%,平均根数为 2.25、3.10和4.10,平均根长为 0.21 、0.40和 0.72cm。 2.4 不同生长素对芦荟生根的影响 将无根芦荟苗接入NAA、IBA均为 0.3mg/L MS培养基 中,结果表明, 生根率和平均根数,NAA(93.3%,5.7条)均优于IBA(64. 3%,2.7条)。
作者单位:上海师范大学生命与环境科学学院,上海200234
参考文献
1 黄祖传,彭淑珍,梁 霞.芦荟的组织培养.植物生理学通讯,1990,(2):41 2 陈雄庭.离体快繁芦荟种苗的研究.热带作物研究,1991,(1):75~78
收稿日期:1999-06-21;修回日期:1999-10-10。
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