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园艺作物栽培 - (11)3.5组织培养
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3.5组织培养
用组织培养的方法进行繁殖是一项先进技术，可用极少量的繁殖材料，繁殖大
量的植株，并可得到脱病毒的壮苗，这在园艺生产中已成为极有效的繁殖手段。
组织培养早在20世纪初即已开始，已有80多年的历史。近年发展很快，并广泛
用于花卉繁殖，现在由琼脂培养转向液体培养，即用发酵罐深层培养，形成微繁殖
工业。也有的在研制无糖培养基，碳源靠增加CO2浓度及提高光照强度的方法提供
目前又在研究人造种子，把用微繁殖技术形成的不定胚和芽条用球形胶囊包裹起来
，形成人造种子。这种人造种子能在适宜条件下，生长发育成核物体。但这项技术
还有很多问题需要进行研究。
(l)意义与作用
组织培养最大特点是“快速繁殖”，只要采集一小部分营养器官，就能繁殖大
量种苗，千百倍地提高繁殖系数；其次是组织培养不受季节和环境条件的影响和限
制，从而为实现大规模工厂化育苗奠定了良好的基础；第三是对长期进行无性繁殖
，并开始退化的花卉品种，通过组织培养，可以进行复壮，使个体发育向年轻阶段
转化；第四是通过组织培养还可获得无病植株，还能解决某些无性繁殖困难的花卉
品种的苗木繁殖问题。
(2)培养基的形成
培养基必须包括可供植物细胞、组织或器官再生时所需的营养物质。其中包括
大量营养元素、微量元素、维生素、生长调节物质和基质等。常用的培养基有MS培
养基( MurashigeSkoog,1962)、改良怀特培养基(White，1963)、密勒培养基
(Miller，1963)、N6培养基(朱至清，1975)和 H培养基(BourginNitsch,1967)等。
以 MS培养基为例，其配方如下
NH4NO31650（mg/I,下同）NO31990+KH2PO4170+MgSO4·
7H2O370+CaCI2H2O440+FeSO4·7H2O27.85
+Na2桬DTA37.25+MnSO4·H2O22.3+H3BO36.2+ZnSO4·7H2O8.6+KI0.83+NaMoO4·
2H2O0.25+CuSO4·
5H2O0.25+CoCI2 ·6H2O0.25+甘氨酸2.0+VB10.4+VB60.5+烟酸0.5+肌醇100+蔗糖
30000+琼脂
10 000,再用HCI或NaOH调整pH5.8即可。
(3)组织培养的基本方法
首先是材料的采集，以植物茎尖、叶、茎、根等营养器官为宜；其次是材料消
毒，一般程序为；流水冲洗→蒸馏水冲洗→无菌纱布吸干材料上水分→消毒刀片将
材料切成小块→70％酒精浸30——60分钟→无菌水冲洗3——4次；第三是制备外植
体，将消毒过的材料，在无菌条件下剥去芽的鳞片和嫩枝外皮，切成2——5mm厚的
小片，叫“外植体”；第四是接种，在超净工作台上，将切好的外植体立即接种在
准备好的培养基上。操作时速度要快，接种后，立即用封口膜或无菌药棉封口；第
五是培养，接种完毕，放入组织培养室进行培养。培养初期，大多使用 MS培养基
。当愈伤组织长到直径约5——15mm时，便在无菌条件下转入H或 N6等分化培养基
，并置于光照条件下，使分化出茎、叶和根；第六是小苗移栽，将小苗从容器中取
出，洗掉根上培养基，再移栽到无菌基质上，经练苗后逐步移入田间苗圃或直接移
栽大田。
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